Faculté des Sciences Biologiques et des Sciences Agronomiques

Permanent URI for this community

https://dspace.ummto.dz/handle/ummto/117

Browse

Browsing Faculté des Sciences Biologiques et des Sciences Agronomiques by Author "ADDAR, Lydia"

Now showing 1 - 1 of 1
  • Thumbnail Image
    Item
    Les caséines alpha S dans le lait de dromandaire: comportement physio- chimique et activités biologiques des entitésprotéiques isolées et de leurs peptides
    (Universite Mouloud MAMMERI Tizi-Ouzou, 2019) ADDAR, Lydia
    De nombreuses études sont entreprises de par le monde ces dernières années afin de confirmer ou d’infirmer les allégations de santé qu’on prête au lait camelin depuis des temps très lointains. Dans ce cadre, nous nous sommes intéressés aux caséines S de ce lait, en vue de leur isolement, purification, caractérisation et évaluation de certaines activités biologiques (antioxydante, antibactérienne et inhibitrice d’enzymes) liées soit à ces protéines natives, soit à leurs fragments peptidiques générés par des hydrolyses enzymatiques par la trypsine, la chymotrypsine ou la pepsine. Les caséines S ont été isolées et purifiées des caséines totales par chromatographie échangeuse d’anions en basse pression sur DEAE-Cellulose et en FPLC sur DEAE-Sépharose. Le diagramme de séparation chromatographique retenu après une série de mises au point est avantageux à plus d’un titre, du fait qu’il a permis d’obtenir, en une seule étape, les caséinesS et  avec un haut degré de pureté, vérifié par électrophorèses (PAGE-urée, PAGE-SDS) et par RP-HPLC sur une C8. Les tests de sensibilité des caséines αS purifiées vis-à-vis de l’action des enzymes sus-citées ont montré que ces protéines sont plus sensibles à l’action de la chymotrypsine, suivis respectivement par la trypsine et la pepsine. L’activité antioxydante a été évaluée par piégeage des radicaux libres (ABTS et hydroxyle), chélation du fer et peroxydation lipidique. Les activités inhibitrices d’enzymes (uréase et tyrosinase), sont mesurées respectivement selon les méthodes indophénol et dopachrome. L’activité antibactérienne a été mise en évidence selon la méthode de microdilution contre deux souches à Gram positif (Listeria innocua ATCC 33090 et Staphylococcus aureus CNRZ 3) et une souche à Gram négatif (Escherichia coli ATCC 25922). Les activités antioxydantes et inhibitrices d’enzymes sont améliorées après le traitement enzymatique par la trypsine et la chymotrypsine. Les meilleures activités ont été enregistrées avec la chymotrypsine (pour l’activité antioxydante et inhibitrice de tyrosinase) tandis que la trypsine génère des peptides possédant une meilleure activité inhibitrice de l’uréase. Les hydrolysats fractionnés par ultrafiltration ont révélé que les fractions peptidiques de faible poids moléculaire (PM<10) présentent les effets les plus remarquables. Enfin, l’activité antibactérienne des fractions protéiques étudiées, montre que la fraction peptidique de petite taille (<1 KDa) exprime l’effet le plus marqué contre l’ensemble des souches testées. Les pourcentages d’inhibition après 24 h d’incubation à 1mg/mL ont été de : 58,98 ± 1,37, 36,4 ± 1,44 et 28,57 ± 0,71%, respectivement pour Listeria innocua, Staphylococcus aureus et Escherichia coli.