Département de Biologie

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Browsing Département de Biologie by Author "Bedouhene -Fenane, Samia"

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    Capacité anti-oxydante des polyphénolsissus de l'olive et des margines sur les fonctions du neutrophile humain dans les conditions de stress oxydatif : Identificationdes cibles moléculaires de l'oleuropeine et de l'hydroxytyrosol
    (Universite Mouloud Mammeri, 2018-01-17) Bedouhene -Fenane, Samia
    Les margines d’olive sont produits de façon saisonnière, par les pays producteurs d’huile d’olive. Ces déchets aqueux produits en masse suite au processus de trituration, sont très riches en matière organique et renferme énormément de molécules intéressantes et bioactives, entre autres les polyphénols (pp). Les pp contenus dans ces margines posent un problème de pollution pour les sols et de phytotoxicité, leur extraction de ces eaux peut en effet améliorer leur biodégradation. L’hydroxytyrosol et l’oleuropeine sont des composants biologiques majeurs présents dans l’olive, les feuilles, l'huile d'olive et les margines. Ils présentent de nombreux avantages pour la santé et présentent des effets pharmacologiques intéressants. L'effet anti-inflammatoire de ces molécules a été largement décrit, mais le mécanisme par lequel ils agissent n’est pas encore bien clair, ainsi que leurs cibles spécifiques. L’objectif de cette thèse est de valoriser les pp présents dans les margines et montrer leur intérêt dans le contexte inflammatoire, notamment en les testant sur les fonctions du polynucléaires neutrophiles (PN) humain, à savoir la production des formes réactives de l’oxygène (FRO), la dégranulation et le chimiotactisme. Sur des PN isolés à partir de sang de volontaire sains, nous avons investigué l’effet des pp totaux et les effets des molécules pures de l’hydroxytyrosol et de l’oleuropeine sur les FRO produites pas le PN, notamment par la méthode de chimioluminescence pour les FRO, le test de réduction du cytochrome C par spectrophotométrie pour l’O2- et enfin la cytométrie en flux pour l’H2O2. D’après nos résultats l’extrait de pp issu des margines d’olive inhibe les FRO produits par les PN stimulés et il piégerait particulièrement l’H2O2. Dans cette première partie, nous avons montré que l’extrait phénolique exerce un effet antioxydant, en piégeant l’H2O2, mais n’a pas d’effet sur la production de l’anion superoxyde de l’oxygène, produit direct de la NADPH oxydase. En second lieu, nous avons observé que l’hydroxytyrosol et de l’oleuropeine inhibent de manière significative l'activité de la myéloperoxydase, induite physiologiquement par le peptide bactérien N-formyl-méthionyl-leucyl-phénylalanine (fMLP), sans aucune cytotoxicité au moins pour les concentrations testées. Nous avons confirmé par SDS-PAGE et immunoblot que l’hydroxytyrosol et l’oleuropeine diminuent de manière significative la libération des granules azurophiles et spécifiques au niveau des PN. Nous avons également montré que l’hydroxytyrosol et l’oleuropeine réduisent la migration des PN sous agarose. Il est intéressant de noter que l’hydroxytyrosol et l’oleuropeine inhibent l'activité des MAP kinases impliquées dans des voies de signalisation des réponses immunologiques chez les PN. Nos données suggèrent que l’hydroxytyrosol et l'oleuropeine sont capables de moduler la réponse inflammatoire et réduire les pathologies associées à l'hyper activation des PN, tels que l'asthme, la polyarthrite rhumatoïde.